硼替佐米通过下调smad泛素化调节因子2拮抗TNF-α诱导的肾小管上皮细胞表型转分化

作者：索传健; 周嘉俊; 顾民; 谭若芸

来源：中华器官移植杂志, 2018, 39(04): 232-237.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2018.04.009

• 肾移植
• 硼替佐米
• 肾间质纤维化
• 肾小管上皮细胞

目的通过观察硼替佐米(Bortezomib)对人肾小管上皮细胞(HK-2)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的smad泛素化调节因子2(Smurf2)表达及肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化(EMT)的影响,探讨硼替佐米拮抗HK-2细胞EMT的分子机制。方法以HK-2细胞为对象,将细胞分为对照组、TNF-α组、硼替佐米组及实验组(经硼替佐米和TNF-α共培养),先在倒置显微镜下观察各组细胞的形态,然后采用实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)和蛋白质免疫印记(Western blot)检测各组细胞纤连蛋白(FN)、Smurf2、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)及α平滑肌蛋白(α-SMA)的表达。结果与TNF-α处理组相比,加入硼替佐米干预后,细胞形态仍呈鹅卵石样;但硼替佐米单独处理组与对照组相比,细胞形态并没有发生明显变化。与对照组相比,TNF-α组细胞中FN的mRNA和蛋白表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);与TNF-α组相比,加入硼替佐米共刺激可抑制TNF-α诱导的FNmRNA和蛋白水平增高(P<0.05);而硼替佐米单独处理组与对照组相比,FN的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,TNF-α处理后可致HK-2细胞中E-cadherin明显降低,α-SMA明显增高(P<0.05);与TNF-α组相比,加入硼替佐米共刺激后,可逆转TNF-α介导的E-cadherin和α-SMA表达变化(P<0.05);而硼替佐米单独处理组与对照组相比,E-cadherin和α-SMA的表达没有明显变化(P>0.05)。与对照组相比,TNF-α处理可引起Smurf2mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.05);加入硼替佐米后则可抑制TNF-α诱导的Smurf2增高(P<0.05);而硼替佐米单独处理组与对照组相比,Smurf2的表达水平没有明显变化(P>0.05)。结论在HK-2细胞中,硼替佐米能抑制TNF-α诱导的Smurf2表达及肾小管EMT作用。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院