酰基甘油激酶敲低对结直肠肿瘤细胞HCT116增殖迁移的影响

作者：高娜娜; 贾平平; 石汉平^*

来源：肿瘤代谢与营养电子杂志, 2021, 8(01): 62-66.

• 酰基甘油激酶
• 敲低
• 人结直肠肿瘤细胞
• 增殖
• 迁移

目的探讨AGK敲低对人结肠肿瘤细胞HCT-116增殖、迁移的影响。方法本实验通过构建AGK基因的sh RNA沉默慢病毒质粒,利用第二代慢病毒包装系统制备、浓缩慢病毒液,并感染人结肠肿瘤细胞HCT-116细胞株。经过嘌呤霉素抗性筛选获得敲低AGK基因的HCT-116细胞系。利用qRT-PCR和Western blotting检测AGK敲低后在mRNA水平和蛋白水平表达情况;利用CCK-8试剂盒检测AGK敲低稳定细胞株细胞增殖情况;利用划痕实验检测AGK敲低后对细胞迁移的影响。结果本实验构建的AGK基因的shRNA沉默慢病毒质粒可以有效敲低HCT116中内源性AGK。同野生型细胞株相比,AGK敲低稳转株HCT116-ASR-876和HCT116-ASR-878细胞中AGK的m RNA水平和蛋白水平表达显著地降低(P<0.001)。通过CCK-8检测发现,AGK敲低后显著降低细胞增殖能力(P<0.05)。划痕实验表明,AGK敲低能显著抑制细胞迁移作用。结论 sh RNA慢病毒感染后,HCT-116细胞中AGK基因的表达量显著低于野生型细胞株,并且初步验证了AGK可以促进HCT116细胞的增殖和迁移。

• 单位
  首都医科大学; 首都医科大学附属北京世纪坛医院