金黄色葡萄球菌感染下骨细胞对破骨细胞分化形成的影响研究

作者：仪洋洋; 刘飞飞; 阮玉山; 李绍波; 张磊; 李颖; 任莉荣^*

来源：实用骨科杂志, 2023, 29(05): 427-431.

DOI：10.13795/j.cnki.sgkz.2023.05.018

• 骨细胞
• 破骨细胞
• 骨髓炎
• 金黄色葡萄球菌
• 炎性骨破坏

目的 探讨金黄色葡萄球菌感染下，骨细胞对破骨细胞分化形成的影响。方法 金黄色葡萄球菌感染骨细胞4 h后，灭活金黄色葡萄球菌，换液后细胞继续培养72 h。收集获得骨细胞源性的条件培养基(conditioned medium, CM),使用30%CM(诱导组)、等体积磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline, PBS;空白对照组)及核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand, RANKL;阳性对照组)对破骨细胞前体细胞(RAW264.7细胞)进行诱导培养，培养5 d后通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP)计数破骨细胞分化形成的数目，并通过实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)技术检测破骨细胞分化标志性基因的表达，评价其对破骨细胞分化形成的影响。结果 诱导培养5 d后，TRAP染色显示：空白对照组(PBS组)基本无破骨细胞形成，条件培养基诱导组(30%CM组)及阳性对照组(RANKL组)均见破骨细胞形成，破骨细胞形成的数目经统计分析，各组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05),RANKL组形成的破骨细胞数目多于30%CM组及PBS组。RT-qPCR结果显示，诱导培养5 d后，RANKL组及30%CM组破骨细胞分化形成的标志性基因：TRAP、calcitonin receptor(Cal R)、cathepsin K(Cathe K)、MMP-9的表达均高于PBS组，各组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 金黄色葡萄球菌感染下，骨细胞可通过分泌某些活性因子促进破骨细胞分化形成增多，进而参与炎性骨破坏的病理过程。

• 单位
  大理大学第一附属医院