与草甘膦特异结合的核酸适配体筛选及应用

作者：秦鸣蔚; 张晓萌; 靖乐; 宋玉竹; 张金阳; 夏雪山; 韩芹芹^*

来源：分析科学学报, 2020, 36(01): 57-62.

DOI：10.13526/j.issn.1006-6144.2020.01.011

• 核酸适配体
• 体外指数富集配体的系统进化技术
• 草甘膦
• 酶联寡核苷酸测定

通过体外指数富集配体系统进化(SELEX)技术,筛选靶向草甘膦核酸适配体A08。使用酶联寡核苷酸测定法(ELONA)和斑点印迹确认草甘膦核酸适配体A08与草甘膦的特异性,未观察到非特异性。基于ELONA平台,草甘膦检测限为4 ng/μL。圆二色谱(CD)实验表明,草甘膦核酸适配体A08形成茎环和分子内G-四链体,可以稳定存在于结合的磷酸盐缓冲溶液中。此外,亲和力实验显示草甘膦与核酸适配体之间具有强的结合力,解离常数(Kd)为38.38±9.094 nmol/L。基于草甘膦核酸适配体A08的ELONA法测定的准确性在真正的草甘膦样品中得到证实。获得的草甘膦核酸适配体A08为制备检测草甘膦试剂盒奠定了坚实的基础。

• 单位
  昆明理工大学