日化产品中洋葱伯克霍尔德氏菌复合群(Bcc)的分类和神秘伯克霍尔德氏菌的耐药性研究

作者：张淑瑶; 文霞; 苏皑庭; 黄迪; 陶宏兵; 陈漪汶; 谢小保^*

来源：微生物学报, 2023, 63(09): 3616-3627.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20230022

• 洋葱伯克霍尔德氏菌复合群
• 多位点序列分析
• 神秘伯克霍尔德氏菌
• 耐药性
• 日化产品

【目的】对从2020–2022年不同日化产品中分离的29株洋葱伯克霍尔德氏菌复合群(Burkholderia cepacia complex,Bcc)进行分类和分型，另将2020年前来源于日化产品中6株被鉴定为Burkholderia lata的菌株进行分类更正。探究神秘伯克霍尔德氏菌(Burkholderia aenigmatica)的耐药性。【方法】本文主要应用多位点分型研究方法(multilocus sequence typing,MLST),PCR扩增atpD、gltB、gyrB、recA、lepA、phaC和trp B 7个管家基因片段，将测序结果与MLST数据库中的数据比对分析，获得菌株各管家基因的编号和ST型(sequence type)，对本检测中心分离自日化产品的Bcc进行分型；利用多位点序列分析(multilocus sequence analysis,MLSA)，结合MLST中等位基因的核苷酸序列构建进化树，从而对Bcc进行系统发育分析和鉴定。利用最小抑菌浓度法(minimum inhibitory concentration,MIC)测定Bcc对常见防腐剂(1,3-二羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲、卡松、苯甲酸钠、山梨酸钾)和抗生素(头孢他啶、卡那霉素、四环素)的耐药性。【结果】本文29株Bcc菌株共有5个菌种类型(B. cenocepacia、B. contaminans、B. aenigmatica、B. vietnamiensis和B. stabilis)和15个不同分型，分类过程中发现了7个新等位基因，7个新ST分型(ST2118、ST2120、ST2122、ST2127、ST2128、ST2129和ST2130)并鉴定了其种类。另将2020年前来源于样品中6株被鉴定为Burkholderia lata的菌株用MLST法重新分类鉴定，其鉴定结果均为Burkholderia aenigmatica。11株B.aenigmatica分离株中只有1株对头孢他啶耐药，其他菌均对其不耐药，分别有9株和8株B. aenigmatica对卡那霉素和四环素耐药。卡松和1,3-二羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲(1,3-dimethylmethylol-5,5-dimethylhydantoin,DMDMH)在最大允许量范围内能有效抑制B.aenigmatica的生长，有9株B. aenigmatica表现出苯甲酸钠和山梨酸钾的耐药性。【结论】Bcc的分类较为复杂且存在许多未知等位基因和分型，Burkholderia aenigmatica已经成为污染日化产品的主要Bcc菌株。大部分B. aenigmatica对氨基糖苷类和四环素类抗生素具有耐药性，大部分来自日化产品中的B. aenigmatica对苯甲钠和山梨酸钾均具有耐药性。

• 单位
  广东省科学院; 广东迪美生物技术有限公司; 广东省菌种保藏与应用重点实验室; 广东省微生物分析检测中心