CDK2AP1基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定

作者：刘利军; 杨向明; 张静; 申致远; 孙沫逸

来源：现代肿瘤医学, 2014, 22(04): 751-754.

• CDK2AP1
• 慢病毒
• 过表达载体

目的:构建CDK2AP1基因慢病毒过表达载体,感染人口腔鳞癌细胞系SCC-25细胞系中,为CDK2AP1基因体内外实验研究奠定实验基础。方法:将pCDH-CMV-GFP慢病毒载体Sal I和Xba I酶切位点插入CDK2AP1基因序列,构建pCDH-GFP-CDK2AP1慢病毒质粒。经PCR鉴定、测序验证CDK2AP1基因后,将其和慢病毒包装质粒混合物共同转染病毒包装细胞293TN,转染24小时后产生重组病毒GFPCDK2AP1慢病毒颗粒。经病毒浓缩纯化后,感染SCC-25口腔鳞癌细胞系并测定感染效率。结果:GFPCDK2AP1病毒中携有转染正确的CDK2AP1基因,感染人SCC-25细胞系后能稳定表达。结论:成功地在舌鳞癌细胞系SCC-25中构建了CDK2AP1基因的重组慢病毒过表达载体,为研究其在头颈鳞癌的生物学功能奠定基础。

• 单位
  第四军医大学; 新疆医科大学第一附属医院