摘要
目的:探讨肝损伤微环境在脐血来源的细胞转化为类肝细胞中的作用.方法:采用双室培养法将分离后的人脐血单个核细胞(mononuclear cens,MNC)与小鼠损伤肝脏共培养;分别采用细胞化学染色、反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和基因序列分析方法对培养的细胞进行检测,以获取人脐血MNC向类肝细胞转化的相关信息.结果:在与小鼠损伤肝脏共培养72 h的人脐血MNC中发现大量过碘酸-Schiff染色阳性细胞;RT-PCR显示,与小鼠损伤肝脏共培养48 h和72 h后的人脐血MNC中含有肝细胞标志物人清蛋白(human albumin,hALB)和人哺乳类动物转录因子4(hGATA4)mRNA表达阳性细胞,并通过序列分析确认所得到的hALB和hGATA-4目标片段核苷酸序列与Gene-Bank中的参考序列相吻合,而人脐血MNC与正常小鼠肝脏共培养组、单独培养的人脐血MNC组以及小鼠肝脏细胞的同类对比试验均呈阴性结果.结论:在模拟的肝损伤微环境中,人脐血来源的细胞具有向类肝细胞转化的趋向.
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单位中心实验室; 北京大学深圳医院