酿酒酵母乙醇脱氢酶Ⅰ基因的超表达

作者：秦丽娜; 江贤章; 田宝玉; 舒正玉; 黄建忠

来源：微生物学通报, 2008, (02): 261-266.

DOI：10.13344/j.microbiol.china.2008.02.013

• 酿酒酵母
• 同源重组
• 超表达
• 乙醇脱氢酶
• 乙醇

利用重叠延伸PCR融合磷酸甘油激酶(phosphoglycerate kinase,PGK)启动子和酿酒酵母乙醇脱氢酶基因Ⅰ(alcohol dehydrogenaseⅠ,adh1),将该融合片段插入带有G418抗性基因(KanMX)和loxP位点的pUG6质粒中,并在adh1基因下游插入细胞色素c(Cytochrome c transcription,CYC1)终止子,构建了酿酒酵母整合表达载体pUPGKAT。TthⅢⅠ内切酶线性化后转化酿酒酵母乙醇脱氢酶基因Ⅱ(adh2)敲除菌株YS2-△adh2。根据酿酒酵母同源重组机制,使adh1基因增加1个拷贝,且其中1个拷贝置于PGK强启动子下游,利用PGK启动子的调控成功实现adh1基因的超表达。厌氧发酵试验表明该重组菌株YS2-△adh2-adh1的乙醇产量较出发菌株提高了8.84%。

• 单位
  福建师范大学