摘要
目的 探讨甘露糖-6-磷酸(M6P)对脂肪细胞分化的影响及其分子机制.方法 油红O染色、测定TG及甘油含量观察M6P对3T3-L1前脂肪细胞株脂肪细胞分化进程的影响.激光共聚焦显微镜下观察组织蛋白酶K(CTSK)酶活性变化,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测前脂肪细胞增殖情况,同时RT-PCR检测M6P受体(M6PR)转录表达.结果 经不同浓度M6P干预后,油红O染色逐渐变浅,当M6P 10 mmol/L时细胞完全不被染色.同时TG合成及甘油含量明显下降,有剂量依赖关系,浓度分别为5 mmol/L和8 mmol/L时即与对照组差异有统计学意义(P<0.05).脂肪细胞分化进程中的不同时间点均可检测到M6PR mRNA表达.加入M6P后CTSK酶活性呈剂量依赖性被抑制,10 mmol/L时,CTSK酶活性被完全抑制.MTT显示M6P加入后细胞增殖,10 mmol/L的M6PA值达到0.057±0.091,与对照组相比增加了62.9%(P<0.05).结论 在3T3-L1前脂肪细胞中同样有M6PR表达,M6P可能通过竞争结合M6PR抑制CTSK酶活性,从而影响脂肪细胞分化进程.
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