宁夏无果枸杞芽水提物对老年小鼠Wnt通路信号分子表达的影响

作者:韩怀钦; 陈海军; 孙向平; 王艳平; 丁银秀; 文玉军; 张莲香*
来源:宁夏医科大学学报, 2020, 42(05): 433-439.
DOI:10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2020.05.001

摘要

目的观察宁夏无果枸杞芽水提物(aqueous extract of fruitless lycium sprout,AEFLS)对老年小鼠Wnt/β-catenin通路信号分子的影响。方法 13月龄C57BL/6J小鼠随机分为老年对照组和AEFLS低浓度组(AEFLS1组)、中浓度组(AEFLS2组)和高浓度组(AEFLS3组),6月龄小鼠为成年对照组。AEFLS1组、AEFLS2组、AEFLS3组小鼠分别用浓度为5 mg·kg-1、10 mg·kg-1、20 mg·kg-1的AEFLS灌胃,每天0.2 mL/10 g,老年组及成年对照组小鼠灌胃等量生理盐水,持续8周。用尼氏染色观察海马CA3区锥体细胞尼氏染色情况;RT-PCR法检测小鼠脑海马区β-连环蛋白(β-catenin)mRNA、人叉头框蛋白O1(FoxO1)mRNA和T细胞特异性转录因子4(TCF4)mRNA的表达;免疫组组织化学染色和Western blot技术检测β-catenin、FoxO1和TCF4蛋白的表达。结果尼氏染色结果显示:给予中浓度的AEFLS干预后,海马CA3区锥体细胞层蓝色深染细胞明显增多;给予低浓度或高浓度的AEFLS干预后,蓝色深染的细胞较中浓度组及成年对照组少。RT-PCR结果显示:与成年对照组比较,老年对照组β-catenin mRNA、FoxO1 mRNA表达水平降低,TCF4 mRNA表达水平升高(P均<0.05);与老年对照组比较,AEFLS3组β-catenin mRNA、FoxO1 mRNA水平增高,TCF4 mRNA水平降低(P均<0.05)。免疫组化及Western blot检测结果显示:与成年对照组比较,老年对照组β-catenin、FoxO1蛋白表达降低,TCF4蛋白表达增加(P均<0.05);与老年对照组比较,AEFLS2组β-catenin蛋白及AEFLS3组β-catenin、FoxO1蛋白表达增加,AEFLS3组TCF4蛋白表达降低(P均<0.05)。结论中、高浓度宁夏AEFLS可能通过上调老年小鼠Wnt/β-catenin通路信号分子FoxO1、β-catenin基因和蛋白的表达,下调TCF4基因和蛋白的表达,从而发挥神经保护作用。

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