基于NLRP3炎症通路探讨健脾益肾化浊方对多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能的影响

作者:陈苗; 杜小利*; 冯亚宏; 张晓静; 罗嘉琦; 王静; 南楠; 刘文钊; 邢莎莎; 田瑞莹; 杨丽; 孙苗; 何瑞; 陈冬梅; 马会明*
来源:中国实验方剂学杂志, 2022, 28(20): 61-70.
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.20221942

摘要

目的:探究健脾益肾化浊方(JPYSHZ)改善多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢功能的作用机制。方法:将70只SD雌性大鼠随机分为6组,空白组和模型组各15只,二甲双胍组(0.1 g·kg-1)、JPYSHZ低、中、高剂量组(1.275、2.55、5.10 g·kg-1)组各10只。空白组给予生理盐水(10 mL·kg-1)灌胃和普通饲料喂养,其余各组均采用来曲唑(1 mg·kg-1)灌胃联合高脂饲料喂养21 d构建PCOS模型,造模结束后,空白组和模型组给与等体积生理盐水灌胃,各药物组给予相应剂量的药物灌胃,共30 d。比较造模前与造模后大鼠体质量和空腹血糖(FPG)变化;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠卵巢组织形态学改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)监测大鼠血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、抗苗勒管激素(AMH)和雌二醇(E2)水平,并计算LH/FSH;免疫组化法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢组织中核苷结合寡聚化域蛋白样受体3(NALP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18和IL-6)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠卵巢中可见较多囊性扩张的大卵泡,未见优势卵泡、卵泡颗粒层减少且排列松散,黄体数量明显减少;血清T、LH、AMH和LH/FSH明显升高(P<0.05,P<0.01),FSH和E2明显降低(P<0.05,P<0.01);卵巢组织中NALP3、ASC、Caspase-1、NF-κB、IL-1β、IL-18和IL-6蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,JPYSHZ各剂量组和二甲双胍组卵巢组织中可见各级生长卵泡和黄体,囊性扩张卵泡减少,卵泡颗粒层厚度增加,可见成熟卵泡,卵母细胞局部形态完整;血清T、LH、AMH和LH/FSH明显降低(P<0.05,P<0.01),E2和FSH明显升高(P<0.05);卵巢组织中NALP3、ASC、Caspase-1、NF-κB、IL-1β、IL-18和IL-6蛋白相对表达量明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论:JPYSHZ可通过抑制NLRP3炎症小体激活,减少卵巢组织中各炎性因子释放,调节内分泌水平,有效减轻PCOS炎症状态,发挥改善卵巢功能作用。

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