Aβ1-42寡聚体对α-syn过表达SHSY5YA53T细胞自噬功能的影响

作者：郭曼莉; 高玉元; 张晴曦; 聂坤; 王丽娟^*

来源：中国神经精神疾病杂志, 2019, 45(07): 422-426.

DOI：10.3969/j.issn.1002-0152.2019.07.008

• α-突触核蛋白
• Aβ1-42寡聚体
• 帕金森病
• 自噬

目的构建人A53T突变型α-突触核蛋白过表达的SHSY5Y细胞模型,观察Aβ1-42寡聚体对细胞的毒性作用和自噬功能的影响。方法利用慢病毒稳转方法构建A53T突变型α-突触核蛋白过表达的SHSY5Y细胞及空载体对照细胞,RT-qPCR方法检测SHSY5Y细胞中α-突触核蛋白mRNA的表达。用Aβ1-42寡聚体干预两组细胞24 h,CCK-8法检测Aβ1-42寡聚体对细胞增殖的影响,Western Blot检测细胞自噬相关蛋白的表达水平。结果慢病毒转染SHSY5Y细胞后,过表达组细胞内α-突触核蛋白表达水平较正常细胞组及开载体对照组增加,差异有统计学意义(P<0.001);人A53T突变型α-突触核蛋白过表达不影响细胞的增殖;不同浓度Aβ1-42寡聚体(0、0.5μmol/L、1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)处理细胞24 h后,细胞增殖抑制率成浓度依赖性;Aβ1-42寡聚体处理后,α-突触核蛋白过表达组细胞LC3-Ⅱ,Beclin-1自噬蛋白表达水平较对照组细胞显著降低(P<0.05)。结论人A53T突变型α-突触核蛋白过表达不影响的SHSY5Y细胞增殖,Aβ1-42寡聚体对α-突触核蛋白过表达细胞具有显著毒性,对细胞的损伤机制可能通过抑制细胞自噬功能。

• 单位
  广东省人民医院（广东省医学科学院）; 华南理工大学