鸡血藤乙酸乙酯提取物对NK细胞免疫杀伤功能的影响

作者：杨丽娜; 张阳; 杜欣珂; 刘丽; 张径; 杨庆; 孙立东; 朱晓新^*; 李琦^*

来源：中国中药杂志, 2023, 1-9.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20231123.402

• 鸡血藤
• 自然杀伤(NK)细胞
• NKG2D
• NKG2A
• IFN-γ

探讨鸡血藤乙酸乙酯提取物(Spatholobi Caulis extract from ethyl acetate， SEA)在生理状态下对自然杀伤(natural killer ， NK)细胞的免疫调节作用及其潜在机制。利用C57BL/6J小鼠及NK-92细胞系为研究对象，设置空白组(NC)、给药组(SEA)的动物实验分组及0、25、50、100 μg·mL-1 SEA给药浓度的细胞实验分组。实验过程中及结束后获取小鼠体质量及免疫器官指数并进行差异分析；应用LDH法检测SEA对NK-92的细胞毒性及小鼠NK细胞对其靶细胞YAC-1的杀伤活性；应用CCK-8法检测SEA对NK-92细胞增殖的影响；应用流式细胞术检测小鼠外周血中NK细胞数目及NK细胞膜表面自然杀伤细胞2族成员A和D(natural killer group 2 member A、D， NKG2A、NKG2D)的表达；应用ELISA法检测小鼠血清中干扰素γ (interferon gamma，IFN-γ)分泌的改变；应用半定量PCR法检测小鼠脾细胞中NKG2A、NKG2D、IFN-γ mRNA的表达；应用Western blot法对磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase， PI3K)/细胞外调节蛋白激酶1(extracellular regulated protein kinases 1，ERK1)信号通路进行SEA药效机制的初步分析。实验结果证实，SEA对机体无明显毒副影响，可以显著增加小鼠体内NK细胞的数目及NK-92细胞对YAC-1的杀伤功能，可以抑制NKG2A受体表达并增强NKG2D受体表达，加强IFN-γ的分泌，加强PI3K/ERK信号通路蛋白表达。该研究实验结果提示，SEA具备增强NK细胞免疫识别杀伤功能，这一药效可能与增加NK细胞数目、重塑功能性受体表达稳态，调动PI3K/ERK信号通路并增强IFN-γ的分泌有关。

• 单位
  中国中医科学院中药研究所