仔猪先天性震颤瘟病毒RT-PCR检测方法的建立

作者：吴松松; 周荷田; 张文波^*; 邓舜洲; 张志庆; 杨丹凤

来源：动物医学进展, 2019, 40(04): 28-31.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.04.005

• 仔猪先天性震颤
• 瘟病毒
• 逆转录-聚合酶链反应

旨在建立检测仔猪先天性震颤瘟病毒(APPV)的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法。根据GenBank上登录的APPV基因组序列,设计1对引物,以临床上表现典型震颤仔猪的淋巴结为材料,提取RNA,建立了RT-PCR方法,并进行敏感性、重复性和特异性试验,对其扩增产物测序比对分析;利用该方法,对临床病料进行检测。结果显示,从典型震颤仔猪的淋巴结中均扩增到与预期大小有一致的片段,经测序比对,扩增片段序列与APPV相应片段的核苷酸同源性在89%以上;该方法只能扩增出APPV片段,而其他几种常见猪病毒均为阴性,3次重复检测结果基本一致,可检测最低cDNA浓度为184.11ng/μL;对临床病料检测,典型病例的检出率达100%。试验结果表明,建立的RT-PCR方法具有良好的特异性、重复性、敏感性等优点,可用于临床APPV引起的仔猪先天性震颤早期检测、病毒鉴定和分子流行病学调查。

• 单位
  江西金伊博生物科技有限公司; 江西农业大学