pcDU6质粒载体介导的表达TGF-β_1 sh RNA的质粒构建

作者：刘虹; 刘伏友; 彭佑铭

来源：医学临床研究, 2004, (03): 245-248.

• 转化生长因子β
• RNA
• 质粒

【目的】用 pcDU6质粒载体构建介导转化生长因子 β1(TGF β1)短发夹RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)表达的质粒。【方法】针对TGF β1的以GGCC开始的 2 1碱基大小的片段 ,分别设计 2对寡核苷酸 ,形成双链后将其依次连入带有U6启动子的pcDNA3.1(- )载体 (命名为 pcDU6 ) ,两对DNA双链通过BamHⅠ酶切位点连接后形成中间由 6个碱基序列间隔的反向互补序列 ,构建成TGF β1短发夹RNA的产生质粒。【结果】经酶切、连接后构建成的质粒称之为 pcDU6 A1 A2和 pcDU6 B1 B2 ,经酶切与测序证实构建成功 ,无任何碱基突变。【结论】成功构建了能表达TGF β1shRNA的质粒载体 pcDU6 A1 A2和pcDU6 B1 B2 ,可能为临床防治长期腹膜透析病人的腹膜纤维化提供高效的方法。

• 单位
  中南大学湘雅二医院