组蛋白去乙酰化酶3抑制剂通过减轻氧化应激降低缺氧/复氧引起的PC12细胞凋亡

作者：雷蕾^*; 陆铉; 杨劲松; 尤玉珍; 梅燕

来源：解剖学报, 2021, 52(05): 706-711.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2021.05.006

• 组蛋白去乙酰化酶抑制剂
• 氧化应激反应
• 缺氧/复氧
• 流式细胞术

目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)抑制剂(HDAC3I) RGFP966在PC12细胞缺氧/复氧(H/R)损伤中的作用。方法采用PC12细胞缺氧4 h复氧24 h培养建立H/R细胞损伤模型。H/R+抑制剂组采用RGFP966预处理1 h后进行H/R处理。实验分为3组,对照组、H/R组和H/R+抑制剂组,每组重复3次。采用MTT法测定细胞活性,比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH),流式细胞术分别检测细胞凋亡率和胞内活性氧簇(ROS),黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,Western blotting法检测Bcl-2促凋亡基因(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、剪切型Caspase-3 (cleaved-Caspase-3)和HDAC3蛋白表达。结果与对照组相比,H/R组与H/R+抑制剂组细胞活力均显著降低(P<0.05),细胞LDH(P<0.05)和凋亡率(P<0.05)均显著升高。H/R+抑制剂组与H/R组相比,H/R+抑制剂组细胞活力显著高于H/R组(P<0.05),而H/R+抑制剂组细胞LDH(P<0.05)和凋亡率显著低于H/R组(P<0.05)。此外,与对照组相比,H/R组与H/R+抑制剂组ROS和MDA(P<0.05)均显著增加,SOD显著降低(P<0.05); H/R+抑制剂组与H/R组相比,H/R+抑制剂组ROS和MDA(P<0.05)显著低于H/R组,而SOD水平高于H/R组(P<0.05); Western blotting结果表明,与对照组相比,H/R组与H/R+抑制剂组Bax、cleaved-Caspase-3均显著升高,Bcl-2显著降低(P<0.05),H/R+抑制剂组Bax、cleaved-Caspase-3均显著低于H/R组,Bcl-2显著高于H/R组(P<0.05);与对照组相比,H/R组HDAC3蛋白表达显著升高(P<0.05),而H/R+抑制剂组HDAC3蛋白显著降低(P<0.05)。结论 HDAC3I通过减轻氧化应激降低缺氧/复氧引起的PC12细胞凋亡。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院; 武汉科技大学城市学院