靶向DEC-205的弓形虫SAG1 DNA疫苗的构建及鉴定

作者：林霞琳; 黄春芳; 陈育琪; 李丽娜; 魏坤亚; 陈欢; 黄志坚; 殷光文^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2020, (20): 72-159.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.12.0256

• 弓形虫
• DNA疫苗
• SAG1抗原
• 树突状细胞
• DEC-205单链抗体
• 重组质粒

为了构建新型弓形虫DNA疫苗并鉴定,试验以弓形虫SAG1作为疫苗候选抗原,融合小鼠树突状细胞(DC)表面分子DEC-205的单链抗体(single chain antibody fragment against DEC-205, scFv DEC-205),构建可表达弓形虫速殖子的表面抗原SAG1和scFvDEC-205-SAG1的DNA质粒,对该质粒进行酶切鉴定,同时用该质粒对真核细胞进行转染,对目标蛋白的表达情况进行鉴定。结果表明:经电泳、双酶切及测序证实目的基因大小与实际相符,重组质粒pVAX1-scFvDEC205-SAG1构建成功;经Western-blot和细胞免疫荧光试验证实重组质粒pVAX1-scFvDEC205-SAG1可成功表达目的蛋白。说明成功构建重组DNA疫苗pVAX1-scFvDEC205-SAG1并在体外表达。

• 单位
  福建农林大学; 动物科学学院