百草枯致小鼠肺泡上皮细胞损伤过程中microRNA表达谱分析

作者：赵化玮; 刘昊; 刘丽英; 董雪松^*

来源：解剖科学进展, 2021, 27(04): 467-474.

DOI：10.16695/j.cnki.1006-2947.2021.04.021

• 百草枯
• 微小RNA
• 肺泡上皮细胞
• 基因芯片分析
• 小鼠

目的研究百草枯(PQ)致小鼠肺泡上皮细胞损伤过程中microRNA(miRNA)表达谱的变化,并预测差异表达的miRNA靶基因和相关的生物学功能。方法体外培养小鼠肺泡上皮细胞系MLE12细胞,加入不同浓度的PQ,通过CCK-8方法检测细胞活力以及流式细胞术检测细胞凋亡率,最终选择100μM PQ作为合适的实验浓度。进一步设立对照组和实验组,对照组加入等量PBS的培养液,实验组加入100μM PQ的培养液,24h后用基因芯片检测两组microRNA表达谱的改变,分析差异表达的miRNA并用生物信息学方法预测靶基因及相关信号调节通路。结果 100μmol/L PQ处理MLE-12细胞24h后,细胞活性下降约50%,细胞凋亡率约15%。基因芯片共筛选出11个差异表达的miRNA,其中1个被上调,10个被下调。预测这些上下调的miRNA靶基因与细胞的线粒体凋亡途径以及DNA的甲基化相关,参与PI3K-Akt、mTOR、RAS、TNF和MAPK等与氧化应激以及凋亡相关的信号通路的调节。结论 PQ对小鼠肺泡上皮细胞的损伤进程中microRNA表达谱发生了改变,这些差异表达的miRNA可能是细胞氧化应激及凋亡的重要调节因素。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院