耐有机溶剂脂肪酶基因lipI的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达

作者：王琰; 张志敏; 王军; 张琨; 訾静; 万一; 王燕; 张继生; 高建新

来源：河南农业科学, 2013, (06): 143-148.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2013.06.039

• 耐有机溶剂
• 脂肪酶基因
• 毕赤酵母
• 表达 tolerance to organic solvent
• lipase gene
• Pichia pastoris
• expression

为了实现耐有机溶剂脂肪酶基因的真核表达,参照GenBank公布的脂肪酶基因序列设计简并引物,通过PCR扩增出G.geotrichumSXL-107的全长1 692bp、编码563个氨基酸的脂肪酶基因lipI,基因登录号为JX074060。利用Signal P 3.0软件对lipI基因序列进行分析,将去除自身信号肽的成熟lipI基因克隆到诱导型表达载体pPIC9K上,构建胞外重组表达载体pPIC9K li-pI,转化毕赤酵母KM71,发酵培养72h,发酵上清液中脂肪酶活力达到70U/mL,与野生型脂肪酶产生菌Galactomyces geotrichum SXL 107相比,脂肪酶活力提高7倍。...

• 单位
  陕西省微生物研究所