塞来昔布对手术应激产生的非小细胞肺癌抗失巢凋亡的影响

作者：王雅静; 施润; 游庆军; 王安彭; 夏文杰; 许林; 张帅; 蒋峰

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(04): 695-698.

• 塞来昔布
• 非小细胞肺癌
• 手术应激
• 失巢凋亡

目的探讨塞来昔布(celecoxib)对肺腺癌手术应激所致非小细胞肺癌细胞A549的抗失巢凋亡的影响及其分子作用机制。方法采用多聚2-羟乙基甲基丙烯酸酯(poly-HEMA)覆盖细胞培养板培养A549细胞,分别设立对照组、前列腺素E2(PGE2)处理组、PGE2联合塞来昔布处理组,处理48 h后应用流式细胞术检测各组中细胞发生失巢凋亡情况。采用Western blot方法检测各组细胞的丝裂原细胞外激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路激活以及下游凋亡相关蛋白Mcl-1和Bim的表达。应用BALB/c小鼠开胸手术模拟手术应激,进行尾静脉注射A549细胞建立肺转移动物模型。将小鼠分成对照组、手术组和手术+塞来昔布组(完全随机化分组),4周后处死小鼠并观察肺转移,同时采用免疫组织化学方法检测转移产生的肺结节中Mcl-1和Bim的表达。结果流式细胞术检测结果表明poly-HEMA培养的A549细胞凋亡率为(41.0±2.4)%,而PGE2处理组的凋亡率为(22.8±3.2)%,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.012),PGE2联合塞来昔布处理组的凋亡率为(36.6±2.4)%与PGE2组比较,差异有统计学意义(P=0.034)。Western blot结果显示,PGE2能激活MEK/ERK1/2通路,上调ERK1/2的磷酸化水平,并降低Bim的表达,而塞来昔布能明显抑制PGE2的作用。另外PGE2对PI3K/Akt通路无明显作用,但塞来昔布可以抑制该通路,并下调Akt的磷酸化水平,抑制Mcl-1的表达。体内实验中,手术组的肺结节数明显多于对照组,而塞来昔布组肺结节数与手术组比较明显减少,免疫组织化学检测肺结节中的Mcl-1和Bim蛋白的表达水平,结果与体外实验一致。结论 PGE2是手术应激中产生的主要细胞因子,PGE2具有明显的体外抗失巢凋亡作用,且塞来昔布在体内外皆能通过抑制MEK/ERK1/2通路和PI3K/Akt通路来升高促凋亡蛋白Bim的表达和降低抗凋亡蛋白Mcl-1的表达,从而达到促进失巢凋亡,减少肺癌细胞转移的作用。

• 单位
  南京医科大学; 第一临床医学院; 江苏省肿瘤医院