摘要
【目的】克隆芥蓝中的BoaBKI1基因,进行生物信息学与表达分析。【方法】采用改良CTAB法提取芥蓝总RNA,并反转录为cDNA;设计引物,克隆BoaBKI1基因;使用生物信息学方法分析BoaBKI1基因序列;用半定量PCR进行BoaBKI1基因的时空表达分析。【结果】成功克隆到BoaBKI1基因,序列分析显示其开放阅读框为1 026 bp,编码20种氨基酸;理论分子量为37.30 k D,等电点为9.67,分子式为C1603H2586N476O534S7。同源性序列比对和进化树分析发现芥蓝BoaBKI1与同属植物甘蓝、欧洲油菜的序列一致性高达99%。半定量PCR分析发现,不同发育时期中,BoaBKI1基因在芥蓝真叶期表达量最高,萌动种子期最低;花蕾中花瓣表达水平最高,萼片表达水平最低;开放花朵中雌蕊表达量明显高于其他器官;随花朵开放,BoaBKI1基因在各个花组织中表达水平均出现上调,雌蕊和雄蕊趋势最显著。【结论】上述结果可为研究芥蓝BoaBKI1的功能与调控机制提供理论依据。
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