siRNA沉默STAT3基因对肝癌细胞株HepG2中STAT3及其下游相关基因表达的影响

作者：靳秋月; 张东昌; 张敏; 陈立军

来源：武警后勤学院学报(医学版), 2015, 24(02): 92-80.

DOI：10.16548/j.2095-3720.2015.02.027

• STAT3基因
• 肝癌
• RNA干涉
• HepG2细胞株
• 基因表达

【目的】探讨小分子干扰RNA片段(small interfering RNA,si RNA)沉默信号转导与转录活化因3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)基因对肝癌细胞株Hep G2生长、凋亡及STAT3与其下游基因表达的影响。【方法】构建STAT3-si RNA,并将其稳定转染到肝癌细胞株Hep G2中,建立Hep G2/STAT3-si RNA细胞株。MTT比色法检测转染对细胞增殖的影响;RT-PCR和Western blotting分别检测STAT3基因及其下游细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、存活蛋白(survivin)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因m RNA和蛋白表达水平;Hochest33342荧光染色法检测细胞凋亡。【结果】MTT结果显示,转染后Hep G2细胞存活率显著降低(t=4.262,P=0.001;t=25.330,P=0.000;t=50.288,P=0.000)。RT-PCR和Western blotting结果显示,转染后Hep G2细胞STAT3、cyclin D1、survivin、VEGF基因m RNA和蛋白表达水平显著降低(F=770.918,P=0.000;F=940.630,P=0.000;F=723.783,P=0.000;F=582.362,P=0.000)(F=496.363,P=0.000;F=484.556,P=0.000;F=468.469,P=0.000;F=193.845,P=0.000)。Hochest33342荧光染色结果显示,转染后细胞凋亡显著增加(F=3311.491,P=0.000)。【结论】通过RNA干扰技术沉默STAT3基因可有效下调肝癌细胞Hep G2中STAT3基因及cyclin D1、survivin、VEGF基因表达并抑制肝癌细胞存活增加细胞凋亡,STAT3-si RNA有望成为治疗原发性肝癌的新技术。

• 单位
  武警后勤学院