糖原合成酶激酶-3β对巨噬细胞系RAW264．7活化的影响

作者：张丹丹; 李珊珊; 李璐; 李俊峰; 郑素军; 段钟平; 陈煜

来源：肝脏, 2014, (8): 610-613.

DOI：10.3969/j.issn.1008-1704.2014.08.017

• 糖原合成酶激酶 3β
• RAW264.7 细胞活化

目的探讨糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）对巨噬细胞系 RAW264．7活化的影响。方法将生长状态良好的 RAW264．7细胞分为3组：实验对照组、脂多糖（LPS）组和 GSK-3β特异抑制剂 SB216763干预组，在12 h、24 h 进行指标检测。采用 Western 印迹法检测细胞 GSK-3β、p-GSK-3βser9蛋白的表达，ELISA 试剂盒法检测细胞上清 IL-10、TNF-α的变化，RT-PCR 检测细胞中5-LO mRNA 变化，免疫荧光法检测 ED1表达，电镜下观察 RAW264．7细胞形态变化。结果12 h 和24 h LPS 组与对照组相比，p-GSK-3βser9表达减少，GSK-3β表达不变，活性升高；TNF-α、IL-10及5-LO mRNA 表达增多（P ＜0．05）；ED1表达绿色荧光明显增多；透射电镜观察 LPS 组巨噬细胞形态不规则，吞噬坏死物质细胞变多。12 h 和24 h SB216763干预组与 LPS 组进行比较，p-GSK-3βser9表达明显增多，GSK-3β表达不变，活性降低；TNF-α及5-LO mRNA 表达减少（P ＜0．05），IL-10表达明显增多（P ＜0．05）；ED1绿色荧光表达减少；透射电镜观察细胞形态较规则。结论GSK-3β对于 RAW264．7细胞活化发挥重要的作用。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院