摘要

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-15b对结直肠癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测结直肠癌细胞株和正常结直肠细胞中mRNA的表达水平;构建pMIR-Report-转移抑制因子(MTSS1)及pMIR-Report-MTSS1 mut重组质粒, 利用双荧光素酶报告系统验证miR-15b与MTSS1之间的靶向关系;在结直肠癌细胞HCT116中转染miR-15b抑制剂和miR-15b mimics, 噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖, 流式细胞术检测周期, PT-PCR和Western blot分别检测MTSS1 mRNA及其蛋白的表达。结果 miR-15b在结直肠细胞中表达上调, MTSS1 mRNA表达下调;miR-15b能靶向抑制MTSS1的表达;miR-15b可促进HCT116细胞增殖, 抑制miR-15b能抑制HCT116细胞增殖。转染miR-15b抑制剂后, MTSS1 mRNA的表达水平(2.532±0.190)明显升高, 转染miR-15b mimics后MTSS1 mRNA表达水平(0.447±0.065)明显降低, 与阴性对照组(1.107±0.084)比较差异均有统计学意义(P=0.004、0.001), 同时抑制miR-15b能够上调MTSS1水平。结论 miR-15b通过靶向下调MTSS1促进结直肠癌细胞增殖, 抑制miR-15b可上调MTSS1的表达, 从而抑制癌细胞的增殖。

  • 单位
    宜昌市中心人民医院; 第一临床医学院; 三峡大学