P2Y12受体介导慢性偏头痛小鼠三叉神经尾侧核小胶质细胞活化的机制

作者：付俊; 孙卫强^*; 余锦芬; 叶小丰; 戴燚

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2020, 34(07): 670-673.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2020.07.006

• 慢性偏头痛
• 血小板二磷酸腺苷受体亚基12受体
• 小胶质细胞活化
• 小鼠

目的探讨血小板二磷酸腺苷受体亚基12(platelet adenosine diphosphate receptor subunit 12, P2Y12)受体在慢性偏头痛小鼠三叉神经尾侧核小胶质细胞活化中的作用及机制。方法 C57BL/6J小鼠150只,随机分为模型组、P2Y12受体阻滞组、对照组各50只。模型组、P2Y12受体阻滞组腹腔注射硝酸甘油溶液10 mg/kg,每2 d/次,连续9次,制备慢性偏头痛模型;对照组腹腔注射等量生理盐水。造模成功后,P2Y12受体阻滞组腹腔注射P2Y12受体拮抗剂1 mL,模型组、对照组腹腔注射等量生理盐水。药物处理12 h,测定3组足底机械痛阈值,采用ELISA法测定血浆降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide, CGRP)水平。采血后处死小鼠,取三叉神经尾侧核,采用Western blot法测定三叉神经尾侧核c-Fos相对表达量;提取三叉神经尾侧核小胶质细胞,MTT法测定小胶质细胞存活率、P2Y12受体阳性表达率,实时荧光定量PCR法检测小胶质细胞组织诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS) mRNA、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β) mRNA、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α) mRNA相对表达量。结果药物处理12 h,机械痛阈值在P2Y12受体阻滞组[(1.56±0.23)g]、模型组[(0.58±0.11)g]均低于对照组[(1.86±0.26)g],模型组低于P2Y12受体阻滞组(P<0.05);血浆CGRP及三叉神经尾侧核c-Fos相对表达量在P2Y12受体阻滞组[(191.70±15.90)ng/L、84.54±4.09]、模型组[(230.12±19.67)ng/L、98.56±5.01]均高于对照组[(76.70±16.40)ng/L、53.09±3.88],模型组高于P2Y12受体阻滞组(P<0.05)。药物处理12 h,小胶质细胞存活率及P2Y12受体阳性表达率在P2Y12受体阻滞组[(88.21±3.86)%、(90.22±4.57)%]、模型组[(98.65±3.81)%、(99.32±5.92)%]均高于对照组[(71.23±4.90)%、(84.24±4.20)%],模型组高于P2Y12受体阻滞组(P<0.05)。药物处理12 h,小胶质细胞iNOS mRNA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA相对表达量在模型组(1.32±0.02、1.21±0.12、0.97±0.04)、P2Y12受体阻滞组(1.22±0.01、1.12±0.05、0.82±0.02)均高于对照组(1.01±0.01、0.98±0.04、0.75±0.02),模型组高于P2Y12受体阻滞组(P<0.05)。结论 P2Y12受体可能是通过促进血浆CGRP及三叉神经尾侧核c-Fos蛋白表达,进而促进偏头痛小鼠小胶质细胞活化。

• 单位
  湖北省妇幼保健院