G型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备及其免疫保护效果的评价

作者：赵栋栋; 孙新珂; 于晓禹; 卜华超; 王海荣^*; 刘李雪; 曲正秀; 吕晓阳; 任艳艳

来源：中国预防兽医学报, 2023, 45(10): 1066-1073.

• G型产气荚膜梭菌
• 坏死性肠炎
• 类毒素疫苗
• 抗体水平

为研制G型产气荚膜梭菌类毒素疫苗，本研究将G型产气荚膜梭菌菌株(7a9-2、D3-2)增菌培养后接种产毒培养基高效产毒，除菌后获得外毒素，经粗提后进行SDS-PAGE检测。结果显示：制备的G型产气荚膜梭菌外毒素含有α、NetB两种毒素蛋白。将两株G型菌株所产外毒素经2倍倍比稀释后经腹腔注射小鼠，检测外毒素的致病性，结果显示7a9-2菌株所产外毒素毒力较强，可作为疫苗候选株。因此选择7a9-2菌株制备外毒素，并经甲醛灭活后制备G型产气荚膜梭菌类毒素疫苗，经检验合格后免疫三黄鸡。免疫后5周内，每周随机选取10只鸡采血分离血清，采用ELISA方法检测鸡血清中的抗体效价。结果显示，免疫组鸡血清稀释100倍后，一免组鸡的抗体效价最高可达6.83log2，二免组鸡抗体效价最高可达8.34log2，免疫后鸡体内可产生较高水平的抗G型产气荚膜梭菌的抗体。免疫后实验鸡通过口服鸡球虫卵囊和G型产气荚膜梭菌菌液进行攻毒试验，结果显示，攻毒后免疫组鸡肠道病变程度和发病率均显著低于对照组(P<0.05)。在整个实验过程中观察各组鸡的生长情况，计算鸡平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)，以评估疫苗对鸡生长性能的影响。结果显示，免疫组鸡ADG显著高于对照组鸡(P<0.05)，免疫组鸡与对照组鸡的ADFI无明显差异(P>0.05)，免疫组鸡F/G显著低于对照组鸡(P<0.05)。上述结果首次表明，本研究制备的G型产气荚膜梭菌类毒素疫苗免疫鸡后可显著降低由该菌引起的坏死性肠炎的发病率，且对鸡生长性能有显著提高作用。本研究制备的G型产气荚膜梭菌类毒素疫苗为防控鸡的坏死性肠炎提供了可靠手段，且该疫苗具有良好的应用前景。

• 单位
  动物科技学院; 山东农业大学