多重PCR联合同源加尾技术检测四种食源性致病菌

作者：兰全学; 刘小青; 李幸桓; 胡科新; 陈晶; 严琼英; 赖晓芳; 杨国武

来源：中国食品工业, 2014, (06): 59-64.

DOI：10.3969/j.issn.1006-6195.2014.06.018

• 多重荧光PCR
• 同源加尾
• 食源性致病菌
• 快速检测

[目的]建立快速、准确检测食品中沙门氏菌、大肠埃希氏菌0157、副溶血性弧菌、单增李斯特菌的多重荧光PCR方法。[方法]分别以沙门氏菌、大肠埃希氏菌01 57、副溶血性孤菌和单增李斯特菌的fimY、rfbE、ToxR和hly作为靶基因,将上下游引物采用同源加尾的方式,构建四重荧光PCR体系,分析该体系的特异性、灵敏度,并进行模拟污染实验,将该方法与国家标准检测方法进行方法比对实验。[结果]该体系成功地检测出了四种目标致病菌。初始菌浓度分别为2、3、8、1CFU/ml的沙门氏菌、大肠埃希氏菌01 57、副溶血性弧菌和单增李斯特菌增菌液,在增菌18h后均被检出。[结论]采用同源加尾的方法成功构建了同时检测四种致病菌的多重荧光PCR方法,该方法特异性强、灵敏度高。

• 单位
  深圳市计量质量检测研究院