B组轮状病毒WH-1株nsp2基因的原核表达与抗体制备

作者：尹素改; 芦宝静; 王汉中; 杨继红

来源：武汉大学学报(理学版), 2006, (02): 193-196.

DOI：10.14188/j.1671-8836.2006.02.015

• B组轮状病毒
• nsp2基因
• 克隆
• 蛋白表达
• 抗体制备 Group B rotavirus
• nsp2 gene
• clone
• expression protein
• preparation antiserrum

根据B组轮状病毒(GBRV)WH-1株nsp2基因的全序列,设计引物,用PCR的方法扩增得到nsp2基因的编码区.将其片段克隆到原核表达载体pGEX-KG上,经IPTG诱导,在E.coliDH5α菌株中得到高效表达.表达的GST融合蛋白大小为61×103,经SDS-PAGE分离纯化,免疫小白鼠制备了多克隆抗体.抗体经1∶3 000倍稀释后用于Western Blot分析,获得特异性显色信号.所表达的蛋白和制备的抗体可用于蛋白结构和功能的进一步研究.

• 单位
  中国科学院研究生院; 中国科学院武汉病毒研究所; 病毒学国家重点实验室; 华中师范大学