抑制MS-1细胞Clock基因表达引起DNA甲基化水平降低

作者：李世平; 成姝婷; 王正荣; 刘延友; 汪宇辉; 江舟

来源：西部医学, 2017, 29(08): 1054-1062.

• DNA甲基化
• Clock基因
• MECP2
• Wnt/β-Catenin信号通路

目的探讨Clock基因对MS-1细胞甲基化水平的影响及Clock基因参与调控细胞增殖的机制。方法采用siRNA干扰MS-1细胞Clock基因表达,检测细胞DNA甲基化水平变化,以及甲基化结合蛋白MECP2,影响细胞生长和增殖的Wnt/β-Catenin信号通路β-Catenin基因的表达情况。结果与对照组相比,抑制Clock基因表达后,MS-1细胞甲基化水平显著降低,且Mecp2和β-Catenin基因的表达均明显减少。抑制Clock基因组(CK)和阴性对照组(NC)甲基化DNA占总DNA比率分别为:(1.067±0.034)%和(1.983±0.154)%。Real-time PCR结果表明,CK组β-Catenin基因相对表达量为1.00000±0.09547,NC组为1.62584±0.17167;CK组Mecp2为0.98824±0.12243,NC组为1.80979±0.18520。Western blot结果显示,CK组β-CATENIN/β-TUBLLIN的相对IOD值为1.093368±0.214433,NC组为3.305374±0.260016;CK组MECP2/β-TUBLLIN的相对IOD值为0.289546±0.104738,NC组为0.649544±0.140909。结论 Clock基因能够影响细胞甲基化水平,并且可能通过调控甲基化结合蛋白MECP2表达和Wnt/β-Catenin信号通路影响细胞增殖。

• 单位
  四川大学; 四川大学华西第二医院