猪脑心肌炎病毒3AB蛋白与宿主蛋白RPL11相互作用的鉴定

作者：薛娟; 张昆丽; 张元峰; 黄丽; 杨玉莹; 翁长江

来源：中国预防兽医学报, 2018, 40(05): 375-380.

• 猪脑心肌炎病毒
• 3AB蛋白
• 60S核糖体蛋白L11
• 病毒-宿主相互作用

为了研究与猪脑心肌炎病毒(EMCV)3AB相互作用的宿主蛋白,本实验采用酵母双杂交方法筛选BHK-21细胞cDNA酵母表达文库,获得6个与EMCV 3AB相互作用的宿主蛋白(RFC5、LRWD1、PIH1D1、RPL11、RPS20和LGALS1),经分析显示这些蛋白分别参与DNA复制、有丝分裂和细胞凋亡等过程;酵母共转化试验与免疫共沉淀试验证实EMCV 3AB和RPL11两者之间存在特异性结合;激光共聚焦试验显示EMCV 3AB与RPL11共同过度表达时,二者共定位在细胞核中,而在EMCV感染状态下,3AB与RPL11主要共定位在细胞质中。另外,EMCV感染HeLa细胞能降低细胞中p53的蛋白水平,但3AB并不直接促进p53蛋白降解,表明EMCV 3AB对RPL11-MDM2-p53通路无影响。本研究发现并证实了RPL11与EMCV 3AB之间的相互作用,为进一步研究RPL11蛋白在EMCV复制中的作用奠定了基础。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 长江大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 动物科学学院