鸭腺病毒3型LAMP快速检测方法的建立

作者：陈翠腾; 黄瑜^*; 陈珍; 朱春华; 傅光华; 程龙飞; 刘荣昌; 刘斌琼; 万春和^*

来源：中国预防兽医学报, 2022, 44(03): 289-294.

• 鸭腺病毒3型
• fiber2基因
• LAMP
• 检测

鸭腺病毒3型（DAdV-3）是我国鸭群中出现的一种新型腺病毒，属于腺病毒科禽腺病毒属成员。为建立DAdV-3的快速检测方法，本研究根据DAdV-3的fiber2基因，设计特异性的LAMP检测引物，构建重组质粒标准品pT-DAdV-3，经各反应条件优化，建立了DAdV-3 LAMP快速检测方法。结果显示，建立的LAMP检测方法最佳反应条件为64℃40 min；该方法仅对DAdV-3呈阳性反应，与番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鸭源减蛋综合征病毒等其他常见鸭源传染病病原均无交叉反应，特异性强。该方法对重组质粒标准品的最低检测限为50拷贝/μL；利用本研究建立的LAMP方法、前期建立的PCR方法和基于MGB探针的荧光定量PCR方法对临床收集的66份鸭组织病料样品进行检测，结果显示阳性率分别为13.63%(9/66)、13.63%(9/66)和15.15%(10/66)；且LAMP检测的阳性样品经PCR方法检测和荧光定量PCR方法检测均为阳性，符合率为100%。本研究首次建立了检测DAdV-3的LAMP方法，该方法快速敏感、特异性强，为该病的流行病学调查提供技术支撑。

• 单位
  福建省农业科学院; 福建省禽病防治重点实验室; 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心