活血通降方对反流性食管炎大鼠食管内脏高敏感及LPS/TLR4/MC通路的影响

作者：李培彩; 唐艳萍^*; 尹红; 杨磊; 刘琰; 刘思雨

来源：中国中西医结合消化杂志, 2023, 31(07): 538-551.

• 反流性食管炎
• 活血通降方
• 内脏高敏感
• 脂多糖
• 肥大细胞
• Toll样受体4

目的:研究活血通降方对反流性食管炎(reflux esophagitis, RE)模型大鼠脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)/Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/肥大细胞(mast cell, MC)通路的影响，探讨其对食管内脏高敏感的疗效机制。方法:将50只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、西药组、中药高剂量组及中药低剂量组5个组，每组10只。对照组行腹腔开关术，其余各组均采用改良部分贲门肌切开术+外置幽门部分结扎术联合束缚应激建立RE大鼠模型。造模7 d后，各组分别给予相应剂量药物或相同体积生理盐水灌胃，连续给药14 d, 2次/d。苏木精-伊红染色评价食管黏膜病理表现及评分；采用行为学评分和观察肌电图变化评价大鼠食管的内脏敏感性；采用甲苯胺蓝染色检测食管组织中MC数目；采用免疫组织化学法检测食管组织类胰蛋白酶(tryptase, TPS)和结肠组织中紧密连接蛋白ZO-1及Occludin的表达。采用酶联免疫吸附法检测血清LPS、IL-8含量，采用蛋白免疫印迹法检测食管组织中TLR4的表达，结果:与对照组比较，模型组大鼠滴酸刺激时的行为学评分及颈斜方肌肌电图曲线下面积(area under curve, AUC)比值均明显增高，差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较，西药、低剂量及高剂量中药干预后，各组大鼠行为学评分及肌电图AUC比值均降低，差异有统计学意义(P<0.01)。其中，与西药组比较，中药各组肌电图AUC比值降低更为显著，差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较，模型组血清LPS、IL-8的含量、食管黏膜病理评分和TLR4表达水平、食管组织中MC数目及TPS表达水平均明显升高，差异有统计学意义(P<0.05);结肠组织中Occludin与ZO-1的表达均显著下降，差异有统计学意义(P<0.01)。给予药物干预后，中药低剂量组及高剂量组大鼠血清LPS、IL-8含量、食管黏膜病理评分和TLR4表达、食管组织中MC数目及TPS的表达水平均显著降低，差异有统计学意义(P<0.01);结肠组织中Occludin与ZO-1的表达均上调，差异有统计学意义(P<0.05)。中药高剂量组对上述指标的作用均优于西药组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论:活血通降方可改善RE大鼠食管黏膜炎症和内脏高敏感，机制可能与保护肠黏膜屏障功能，降低LPS水平，抑制LPS/TLR4/MC通路，减少MC脱颗粒和TPS的释放有关。

• 单位
  天津市南开医院; 天津中医药大学