小标本二步酶消化法分离人头皮毛乳头细胞

作者：胡天星; 余南岚; 杨海潮; **; 杨希川^*

来源：中华皮肤科杂志, 2020, 53(09): 725-728.

• 毛囊
• 细胞分离
• 细胞培养技术
• 头皮
• 毛乳头细胞

目的探索小标本高效快速分离培养头皮毛乳头细胞的方法。方法 2018年9月至2019年1月于陆军军医大学第一附属医院皮肤科收集3例头部色素痣、6例皮脂腺痣患者切除术后废弃的含毛皮肤标本, 大小为0.5 cm × 0.5 cm ～ 0.5 cm × 1 cm。剪下含有毛囊的皮下脂肪层, 用眼科镊分选出其中的毛囊, 0.6%分离酶Ⅱ消化30 min, 然后采用0.2%胶原酶Ⅳ 37 ℃消化30 ～ 60 min, 离心获得毛乳头。对分离的毛乳头进行形态学观察, 同时培养、传代、鉴定毛乳头细胞。结果小标本二步酶消化法分离的头皮毛乳头镜下呈倒梨形, 形态完整, 部分可见残留真皮鞘, 而一步酶消化法未分离出毛乳头。小标本二步酶消化法毛乳头分离率为60.8% ± 2.1%, 72 h毛乳头细胞贴壁率为86.6% ± 3.9%, 细胞迁出时间0.5 ～ 3.0 d, 实验总操作时间2.0 ～ 3.0 h, 实际操作时间1.0 ～ 1.5 h。小标本二步酶消化法分离的头皮毛乳头细胞早期可呈凝集性生长, 从第9代细胞开始呈非凝集性生长。结论小标本二步酶消化法是一种简单、高效分离人头皮毛乳头细胞的方法。

• 单位
  第一附属医院皮肤科; 中国人民解放军陆军军医大学