内皮抑制素抑制RhoA/ROCK信号通路减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的实验研究

作者：岳渊; 张涛^*; 柳朝阳; 张鹏霞; 肖漓^*; 张娟

来源：解放军医学院学报, 2023, 1-9.

• 内皮抑制素
• 急性肺损伤
• RhoA/ROCK信号通路
• 细胞因子
• 炎症反应

背景急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是一种由多种诱因引发的急性肺部炎症性疾病，目前仍无有效的防治手段。内皮抑制素(endostatin,ES)能特异性抑制血管内皮细胞增殖和迁移，广泛应用于肿瘤治疗中，但其在急性肺损伤中的作用尚不明确。目的 探讨内皮抑制素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的影响及可能的机制。方法 将36只雄性C57BL/6小鼠随机分为6组：对照组、LPS组(模型组)、ES干预组A(LPS+1 mg/kg ES 6 h)、ES干预组B(LPS+1 mg/kg ES 12 h)、ES干预组C(LPS+5 mg/kg ES 6 h)、ES干预组D(LPS+5 mg/kg ES 12 h)，每组6只。LPS组：将LPS溶液(15 mg/kg)通过肺部液体定量雾化器装置递送至小鼠肺，作用24 h，建立小鼠急性肺损伤模型。对照组：在相同时间点以同样的方式递送等体积生理盐水，作用24 h。ES干预组：LPS刺激小鼠24 h后，腹腔注射不同剂量(1 mg/kg或5mg/kg)的ES注射液，分别作用6 h与12 h。观察各组小鼠肺组织形态学改变；测定肺系数变化；苏木素-伊红染色病理学检查；酶联免疫吸附实验检测小鼠血清中血管内皮生长因子的水平；流式细胞术检测小鼠血清与肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的水平；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测小鼠肺组织细胞凋亡；免疫印记实验检测小鼠肺组织中Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,RhoA)和Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rho-associated coiled-coil-forming protien kinase 1,ROCK1)的表达。结果 与对照组比较，LPS组肺系数增大(P<0.01)；肺损伤评分升高(P<0.01)；肺组织凋亡细胞数增多(P<0.01)；血清血管内皮生长因子水平升高(P<0.05)；血清与BALF中TNF-α和IL-6两种因子的水平升高(P<0.05)；肺组织RhoA与ROCK1蛋白表达增加(P<0.05)。与LPS组比较，ES干预组D肺部炎性渗出浸润减少，肺间质水肿及肺泡结构破坏减轻，肺损伤评分降低(P<0.01)；肺系数减小(P<0.01)；肺组织凋亡细胞减少(P<0.01)；血清中TNF-α、IL-6及VEGF的水平均下降(P均<0.01)；肺组织RhoA与ROCK1表达减少(P<0.05)。结论 内皮抑制素可减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤，可减少肺组织细胞凋亡，其降低肺毛细血管内皮细胞通透性和炎症反应的功能可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。

• 单位
  解放军总医院; 佳木斯大学; 基础医学院