HBx介导miR-221上调-ERα下调致HepG2细胞恶性增殖

作者：陈娟娟; 艾剑刚; 黄世峰; 曹炬; 张莉萍

来源：第三军医大学学报, 2013, 35(20): 2191-2194.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2013.20.010

• HBx蛋白
• miR-221
• 雌激素受体α
• HepG2细胞
• 增殖

目的探讨microRNA221(miR-221)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染相关性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的促癌功能以及HBV基因编码的X蛋白(HBx)诱导miR-221上调促进HepG2细胞异常增殖的分子机制。方法重组HBx腺病毒(Ad-HBx)感染人肝癌HepG2细胞,荧光定量PCR检测HepG2-HBx细胞中miR-221和ERα mRNA表达的变化;流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)蛋白表达水平变化,分别用miR-221 mimic和miR-221 inhibitor转染HepG2细胞后,荧光定量PCR检测HepG2-HBx细胞中miR-221和ERαmRNA表达变化;Western blot检测ERα蛋白水平表达变化。结果 RT-PCR实验证实,adv-HBx感染HepG2细胞后,HBx在HepG2细胞中高效表达;感染48 h后,HBx蛋白可显著上调miR-221[(495.84±61.16)vs(239.25±21.15),P<0.05]并抑制ERα蛋白[(0.24±0.01)vs(0.61±0.02),P<0.05]的表达水平,同时促进HepG2细胞异常增殖[(31.73±3.53)%vs(56.08±1.56)%,P=0.01]。miRNA转染实验及Western blot证实:miR-221抑制ERα蛋白的表达(P<0.05),miR-221抑制剂促进ERα蛋白的表达(P<0.05)。结论 HBx可能通过上调miR-221进而下调ERα对肝癌的保护性效应而促进肝癌细胞异常增殖,靶向miR-221的策略具有抑制肝癌细胞增殖的治疗潜能。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院