紫外线对HaCaT细胞中瞬时受体电位锚蛋白1的影响

作者：刘影; 张婷; 赵光明; 倪静; 王宇鹏; 刘越坚; 宋智琦^*

来源：中华皮肤科杂志, 2017, 50(10): 710-714.

• 角蛋白细胞
• 紫外线
• 瞬时受体电位通道
• 锚蛋白类
• HaCaT细胞

目的探讨HaCaT细胞中瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)的光控作用及其机制。方法培养的HaCaT细胞分为225 mJ/cm2 UVA刺激组和25 mJ/cm2 UVB刺激组, UVA刺激组分为空白对照组(仅有HaCaT细胞)、视黄醛组、UVA组、视黄醛+ UVA组(UVA-TRPA1对照组)、视黄醛+ UVA+肉桂醛组(UVA-TRPA1激动组)、视黄醛+ UVA+樟脑组(UVA-TRPA1抑制组);UVB刺激组分为空白对照组(仅有HaCaT细胞)、视黄醛组、UVB组、视黄醛+ UVB组(UVB-TRPA1对照组)、视黄醛+ UVB+肉桂醛组(UVB-TRPA1激动组)、视黄醛+ UVB+樟脑组(UVB-TRPA1抑制组)。qPCR、Western印迹检测HaCaT细胞中TRPA1的表达。流式细胞仪检测各组HaCaT细胞钙离子内流的变化。结果 qPCR和Western印迹显示, HaCaT细胞中有TRPA1 mRNA及蛋白的表达。UVA作用后空白对照组、视黄醛组、UVA组、视黄醛+ UVA组荧光强度分别为155.06 ± 7.62、148. 37 ± 18.77、166.92 ± 3.71、331.333 ± 40.563, 组间差异有统计学意义(F= 44.509, P < 0.01)。UVB作用后空白对照组、视黄醛组、UVB组、视黄醛+ UVB组荧光强度分别为150.20 ± 1.73、171.66 ± 56.23、147.56 ± 6.60、250.44 ± 9.13, 组间差异有统计学意义(F= 85.261, P < 0.01), 视黄醛+ UVA/UVB组荧光强度均高于空白对照组(q值分别为18.442、6.052, P < 0.01)。TRPA1激动剂和拮抗剂可调节UVA、UVB所引起的钙离子内流的变化(P<0.001), 在UVA、UVB作用下, TRPA1激动剂组荧光强度均高于对照组(q值分别为14.934、32.770, P < 0.001), TRPA1抑制剂组荧光强度均低于对照组(q值分别为7.986、14.596, P < 0.001)。结论 TRPA1在皮肤HaCaT细胞中有表达, UVA或UVB可通过TRPA1调控HaCaT细胞的钙离子内流。

• 单位
  中心实验室; 大连医科大学附属第一医院