摘要
目的 观察轻度及重度低温条件下大鼠肾脏组织内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)通路相关分子表达及凋亡情况。方法 成年雄性SD大鼠,24只,随机分为3组,每组8只。分别为对照组(C组),轻度低温组(MH组)和重度低温组(SH组)。利用低温水槽浸泡身体后将体温降低至目标体温后维持约60 min。术后复温12 h后,利用Western Blot实验观察各组的热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70),冷诱导RNA结合蛋白(Cold-inducible RNA-binding protein,CIRP)的表达变化及ERS通路相关分子蛋白激酶R样内质网激酶(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、肌醇需求酶1α(serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease inositol-requiring enzyme 1,IRE-1α)和免疫球蛋白重链结合蛋白(the immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip)的活化情况,利用Western Blot和免疫组化方法观察ERS诱导凋亡分子C/EBP同源蛋白(the C/EBP Homologous Protein,CHOP)的表达以及分布。结果 和对照组比较,术后12 h,HSP70和CIRP均有不同程度上调。HSP70在MH组和SH组上调均较显著,CIRP蛋白在SH组上调更加显著。术后12 h,p-PERK和p-IRE-1均出现明显上调,Bip活化,提示ERS通路激活。重度低温组肾脏可观察到CHOP蛋白表达上调,进一步用免疫组化方法可以观察到CHOP主要表达在肾小管区域。结论 轻度及重度低温会诱导大鼠肾脏ERS通路活化,重度低温可诱导CHOP蛋白表达上调。
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单位解放军总医院