Ankfy1参与遗传性共济失调的发病机制及其对自噬的影响

作者：唐洁; 丁曼; 卢祖能^*

来源：卒中与神经疾病, 2021, 28(03): 263-267.

• Ankfy1
• 共济失调
• 发病机制
• 自噬

目的探讨Ankfy1(Ankyrin repeat and FYVE domain containing 1,Ankfy1)基因敲低或过表达后对细胞自噬影响,体外实验研究Ankfy1基因突变参与遗传性共济失调的发病机制。方法培养人恶性脑胶质瘤细胞系(U87)细胞,建立Ankfy1基因敲低和过表达的细胞模型,运用电镜扫描观察细胞内的自噬小体;运用Western blot方法检测自噬相关蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine/threonine-protein kinase, ULK1)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Phosphorylation serine/threonine-protein kinase, pULK1)、泛素结合蛋白p62(Sequestosome 1,p62)、微管相关蛋白LC3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3 alpha, LC3)、溶酶体相关膜蛋白1(Lysosomal associated membrane protein 1,Lamp1)和溶酶体相关膜蛋白2(Lysosomal associated membrane protein 2,Lamp2)的水平。结果扫描电镜观察发现Ankfy1敲低组和Ankfy1过表达组未见完整的自噬小体,但可见形态不规则的自噬溶酶体;对照组可见丰富的自噬小体。敲低组和过表达组的自噬相关蛋白的ULK1,pULK1,LC3,Lamp1和Lamp2的表达水平均较对照组高,p62的表达水平均较对照组低。当Ankfy1基因上调或者下调时会对细胞环境造成应激状态,诱导自噬发生,引起自噬通量的增加,但自噬溶酶体形态异常、自噬溶酶体通路受损。结论 Ankfy1基因的上调或者下调会导致细胞自噬溶酶体通路异常,这也许是遗传性共济失调发病的机制之一。

• 单位
  武汉大学人民医院; 神经内科