人尿源干细胞外泌体对髓核样尿源干细胞增殖及分化的影响

作者：朱有福; 李承威; 沈娜娜; 相宏飞; 陈伯华^*; 郭柱^*

来源：精准医学杂志, 2023, 38(04): 283-288.

DOI：10.13362/j.jpmed.202304001

• 干细胞研究
• 髓核
• 外泌体
• 细胞分化
• 细胞增殖
• 组织工程

目的 探究髓核样尿源干细胞(NP-USC)分化程度与分化时间的关系，以及人尿源干细胞外泌体(USC-EXO)对NP-USC增殖及分化的影响。方法 提取、鉴定并共培养髓核细胞(NPC)和尿源干细胞(USC)。根据共培养时间不同将细胞进行分组，A组：共培养7 d后，将NP-USC于无外泌体USC培养基中培养14 d; B组：共培养14 d后，将NP-USC于无外泌体USC培养基中培养7 d; C组：共培养21 d;另设USC组(USC单独培养21 d)和NPC组(NPC单独培养21 d)。使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及Western blot方法检测5组细胞缺氧诱导因子(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、Ⅱ型胶原蛋白(COL2)、蛋白多糖(ACAN)mRNA及蛋白质的表达情况。另将上述5组细胞用无外泌体USC培养基培养28 d,于第7、14、21、28天时采用CCK-8法检测细胞增殖情况。结果 RT-qPCR及Western blot方法检测结果显示，USC、A、B、C组中HIF-1α、GLUT1、COL2、ACAN mRNA及蛋白的相对表达量分别依次升高(t=53.36～371.86,P<0.01),但C组与NPC组4种基因及蛋白相对表达量无显著差异(P>0.05);加入USC-EXO前后，5组细胞中4种基因相对表达量无显著差异(P>0.05)。CCK-8法检测结果显示，在各时间点，USC、A、B、C组细胞活力依次下降(F=3.77～103.58,P<0.05),但C组与NPC组无显著差异(P>0.05)。5组细胞中每组均随着培养时间的延长细胞活力逐渐升高(F=9.96～121.68,P<0.05)。结论 NPC诱导USC时间越长，所形成的NP-USC分化程度越高、增殖速率越低。USC-EXO具有促NP-USC增殖的能力，但其不具有促分化的能力；NP-USC分化程度越高，USC-EXO的促增殖能力越低。

• 单位
  青岛大学附属医院