Ghrelin以非经典受体依赖性方式促进人胚胎干细胞定向分化为心肌细胞的研究

作者：魏蕊; 杨进; 洪天配; 高美娟; 侯文芳; 刘国强; 张琳; 王海宁; 高洪伟

来源：中国糖尿病杂志, 2014, 22(08): 734-740.

• Ghrelin
• 人胚胎干细胞
• 心肌细胞
• 分化

目的探讨Ghrelin对人胚胎干(hES)细胞定向分化为心肌细胞的影响。方法以不同浓度Ghrelin诱导hES细胞定向分化为心肌细胞,显微镜下计数搏动细胞团的比例,应用实时PCR检测心肌特异性标志物的表达。应用RT-PCR、Western blot及免疫荧光染色检测分化细胞中生长激素促分泌物受体1α(GHS-R1α)的表达,添加GHS-R1α拮抗剂[D-lys3]-GHRP-6,观察其对Ghrelin促分化作用的影响。结果与对照组比较,10-10、10-9及10-8 mol/L Ghrelin均可增加搏动细胞团的比例[搏动比例分别为(12.9±1.4)%,(19.5±2.2)%及(13.5±3.1)%vs(10.3±2.2)%,P<0.05]。RT-PCR分析显示,Ghrelin可上调α-肌球蛋白重链(α-MHC)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)的表达[α-MHC:100%vs(40.1±13.2)%,P<0.001;cTnI:100%vs(52.6±9.8)%,P<0.001]。RT-PCR、Western blot及免疫荧光染色均显示GHS-R1α在不同阶段的分化细胞中表达,但酰基化和非酰基化Ghrelin的促分化作用相似,且添加GHS-R1α拮抗剂不能阻断Ghrelin的促分化作用。结论 Ghrelin可促进hES细胞定向分化为心肌细胞,该作用可能由GHS-R1α以外的信号途径所介导。

• 单位
  北京大学第三医院