食蟹猴胚胎干细胞的培养及向神经细胞诱导分化

作者：朱宛宛; 吴迪; 李宁; 邹春林; 徐艳玲; 关云谦; 张愚

来源：基础医学与临床, 2009, 29(07): 709-715.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2009.07.009

• 食蟹猴
• 胚胎干细胞
• 细胞培养
• 神经分化

目的建立食蟹猴胚胎干细胞系体外培养体系,并诱导其向神经细胞分化,为在体移植实验奠定基础。方法用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,长期培养食蟹猴胚胎干细胞。在无血清培养基中添加小鼠重组Noggin的方式诱导其向神经细胞分化,并对分化各阶段细胞进行免疫组化染色检测分化效果。结果食蟹猴胚胎干细胞在饲养层上成克隆样生长,可以长期扩增超过20代并保持胚胎干细胞的特性。诱导向神经细胞分化约14 d,即可形成呈玫瑰花环样的神经前体细胞结构,可见大量Nestin阳性细胞,及部分Tu j-1阳性细胞;分化约21 d时,可见大量Nes-tin阳性细胞以及大量Tu j-1阳性细胞;分化超过35 d,可见GFAP阳性细胞,而Tu j-1阳性细胞减少。结论成功建立食蟹猴胚胎干细胞的培养体系,在此基础上诱导其分化可获得大量神经前体细胞,尤其是早期神经细胞。

• 单位
  首都医科大学宣武医院; 生命科学学院; 首都师范大学