重组胰岛素样生长因子-1的制备

作者：王照林; 冯军; 黄宗庆; 马洁; 赵文杰^*

来源：中国医药工业杂志, 2019, 50(07): 749-754.

DOI：10.16522/j.cnki.cjph.2019.07.009

• 胰岛素样生长因子-1
• 重组表达
• 包涵体
• 复性

本文建立大肠埃希菌高效表达重组人胰岛素样生长因子-1(recombinant human insulin-like growth factor-1,rhIGF-1)的制备工艺。应用本实验室构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a-Sp1-IGF-1,对其进行高密度发酵和IPTG诱导表达,发酵液经双水相萃取获得包涵体,产量为3 g/L;对包涵体进行变性和复性,建立反相HPLC法监测复性过程,复性正确率可达600%;复性液经过柱色谱纯化和冷冻干燥,样品纯度大于98%,总收率为35%。本工艺得到的rhIGF-1,分子质量与理论值一致,其HPLC保留时间、肽图和生物活性均与参比制剂一致。

• 单位
  中国医药工业研究总院; 创新药物与制药工艺国家重点实验室; 上海医药工业研究院