应用流式细胞Index Sorting技术研究小鼠胚胎生血内皮细胞

作者：倪艳丽; 李昀桥; 兰雨; 刘兵^*

来源：生物技术通讯, 2019, 30(02): 242-247.

DOI：10.3969/j.issn.1009-0002.2019.02.017

• Index Sorting技术
• 生血内皮细胞
• 细胞表面分子CD47
• 体外造血孵育

目的:应用流式Index Sorting技术鉴定小鼠胚胎期d10(E10)的主动脉中生血内皮细胞(HEC)的表面分子表达特征,并结合体外孵育实验及免疫组化染色验证HEC的生血潜能。方法:已有研究显示细胞表面分子Kit和CD47均能标记造血相关群体。在此基础上,应用流式细胞Index Sorting技术分选单个分子表型为CD41-CD43-CD45-CD31+Kit+的主动脉内皮细胞,并与基质细胞OP9-DL1共孵育诱导培养7 d,进而结合单个内皮细胞的流式分选特征参数,及诱导后生成CD45+造血细胞和CD31+内皮细胞的效率,综合回溯分析Kit和CD47富集HEC的效果。结果:具有生血潜能的HEC均富集在CD47+内皮细胞群体中,CD47分子将HEC群体的精度提高1.5倍;CD47+内皮群体中,仍有60%以上的内皮不具备生血能力,提示进一步探索寻找富集HEC表面标志的必要性。结论:应用流式细胞Index Sorting技术发现CD47分子能显著富集小鼠胚胎期HEC,为进一步精准富集并研究HEC提供了重要的技术手段。

• 单位
  基础医学院; 暨南大学; 解放军总医院