齿肋赤藓中半定量RT-PCR方法的探讨

作者：杨红兰; 张道远; 马瑞; 刘燕

来源：生物技术, 2010, (02): 23-25.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2010.02.015

• 齿肋赤藓
• 半定量RT-PCR
• 18SrRNA
• 内参基因 Syntrichia caninervis
• Semi-Quantitative RT-PCR
• 18S rRNA
• Internal standard

目的:建立一种半定量RT-PCR方法,用于齿肋赤藓(Syntrichia caninervis)基因表达研究。方法:比较常用的几种内参照基因actin、tubulin及18S rRNA在齿肋赤藓中的表达情况,以确定表达稳定的内参基因;分析PCR扩增动力学,确定内参和靶基因的PCR体系。结果:琼脂糖凝胶电泳检测分析表明:18S rRNA作为齿肋赤藓的内参基因更稳定;同管扩增试验表明:18SrRNA的引物滞后6个循环加入PCR扩增体系中,至第26个循环,二者同时处于指数扩增期,且靶基因RT-A的扩增效率不受影响。结论:18S rRNA与RT-A可以同管扩增,18S rRNA可以作为半定量RT-PC...

• 单位
  中国科学院; 中国科学院新疆生态与地理研究所; 中南林业科技大学