类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-糖蛋白表达及功能变化研究

作者：黄陈; 余丹^*; 杨海峰^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(04): 712-719.

• 类风湿性关节炎
• P-糖蛋白
• 滑膜细胞
• 巨噬细胞

目的：研究类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达及功能的变化，并探讨其与炎症的关系。方法：（1）在体实验采用雌性Wistar大鼠，随机分为对照组和造模组（n=12），造模组建立II型胶原诱导的关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）模型，Western blot检测大鼠滑膜细胞P-gp的表达。（2）动物细胞体外培养实验采用II型胶原酶法分离培养正常大鼠原代滑膜细胞，分为正常培养液（DMEM）组和巨噬细胞条件培养液（macrophage-conditioned medium,MCM）组，源于RAW 264.7细胞的MCM模拟体内炎症状态，Western blot法检测大鼠滑膜细胞P-gp蛋白表达水平，RT-qPCR法检测大鼠滑膜细胞多药耐药基因1a(multidrug resistance gene 1a,Mdr1a)和Mdr1b的mRNA表达水平，以罗丹明123(rhodamine 123,Rho123)及氨甲蝶呤（methotrexate,MTX）为探针评价细胞中P-gp的功能。结果：与对照组大鼠相比，CIA造模组大鼠滑膜细胞P-gp表达显著降低（P<0.01）;II型胶原酶消化法可以成功获得大鼠原代滑膜细胞，免疫荧光显示第3代滑膜细胞98%以上表达vimentin蛋白；维拉帕米（50和100μmol/L）能显著增加大鼠滑膜细胞中Rho123的浓度（P<0.01）；与DMEM组相比，MCM组滑膜细胞Rho123摄取量显著升高（P<0.01）,MTX摄取量亦显著升高（P<0.05），分别增加了40%和37%,Pgp蛋白表达水平显著降低（P<0.01）,Mdr1a的mRNA表达水平显著降低（P<0.01）,Mdr1b的mRNA表达水平无显著差异。结论：类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-gp表达及功能显著降低，可能与局部炎症微环境有关。

• 单位
  江苏农牧科技职业学院; 南京中医药大学