志贺氏菌检测和分群PCR方法的建立

作者:王海艳; 赵治国; 催强; 郭文秀; 陈宇飞; 赵林立
来源:中国动物检疫, 2018, 35(03): 81-85.

摘要

为弥补目前志贺氏菌分子生物学检测方法的不足,根据志贺氏菌的invC、rfc、wbgZ和rfpB等基因,分别设计引物建立了鉴定志贺氏菌属、福氏志贺氏菌、宋内志贺菌和痢疾志贺氏菌的PCR方法。同时,以根据ompA基因设计的引物作为参照,通过特异性试验和人工接种试验等,对该方法进行验证。结果显示:17株志贺氏菌和19株非志贺氏菌均出现100%的特异性反应;对增菌肉汤直接进行PCR检测时,在消毒奶、冰淇淋、酸奶、奶酪、熟肉和香肠等即食食品中的志贺氏菌检出限为13 cfu/(25 g·mL-1),在原奶、生肉和奶粉中的检出限分别为≤12、27和≤27 cfu/(25 g·mL-1);分离培养后再对可疑菌落进行PCR鉴定时,所有样品检出限均为13 cfu/(25 g·mL-1),与传统培养法检出限一致。结果表明,该PCR方法快速、敏感、特异,适合用于志贺氏菌的常规检测分析。

  • 单位
    内蒙古出入境检验检疫局