基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS及谱效学的坤宁颗粒抗凝血活性质量标志物预测

作者：钟林江; 杨放; 吴建雄; 谢志伟; 雷燕莉; 田佩灵; 贾利军; 刘涛^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(07): 168-176.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230353

• 坤宁颗粒
• 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)
• 网络药理学
• 谱效学
• 抗凝血活性
• 质量标志物(Q-Marker)
• 异常子宫出血(AUB)

目的：对坤宁颗粒发挥抗凝血活性的质量标志物(Q-Marker)进行预测分析。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)对坤宁颗粒的化学成分进行分析，检测条件为Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)，流动相乙腈(A)-25 mmol·L-1乙酸铵水溶液(B)梯度洗脱(0～5 min,5%～22%A;5～10 min,22%～30%A;10～15 min,30%～95%A;15～20 min,95%～5%A;20～30 min,5%A)，流速0.2 m L·min-1，柱温30℃，进样量1μL；电喷雾离子源(ESI)，正、负离子检测模式。通过网络药理学方法对化学成分的靶点与异常子宫出血(AUB)的靶点进行交互分析，利用网络拓扑分析筛选出关键成分；通过高效液相色谱法(HPLC)建立10批坤宁颗粒的指纹图谱，采用血液凝固法及纤维蛋白原平板法测定坤宁颗粒的抗凝血活性，建立其谱效关系；选择拓扑分析与谱效关系中共有的成分作为Q-Marker，并对其抗凝血活性进行验证和确认。结果：坤宁颗粒含475个化学成分，丹酚酸B、芍药苷、柚皮苷和新橙皮苷等22个关键成分是治疗AUB的潜在物质基础；谱效分析结果表明，峰7(芍药苷)、峰9(柚皮苷)、峰10(新橙皮苷)和峰11(丹酚酸B)为最优主成分，体外活性实验表明这4个成分可较好地表征其抗凝血活性。结论：丹酚酸B、芍药苷、新橙皮苷和柚皮苷可能是坤宁颗粒发挥抗凝血活性的Q-Marker。

• 单位
  宿州亿帆药业有限公司; 太极集团四川太极制药有限公司; 成都大学; 食品与生物工程学院; 成都天河中西医科技保育有限公司