荧光标记电泳对透明质酸寡糖片段鉴定的方法建立

作者：刘鹥雯; 何怡青; 杨翠霞; 龙莉; 高锋

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2007, 23(07): 600-604.

DOI：10.3969/j.issn.1007-7626.2007.07.015

• 8-氨基奈-1,3,6-三磺酸
• 荧光标记
• 透明质酸寡糖片段

近年来,透明质酸寡糖片段(hyaluronan oligosaccharides,o-HA)的生物学活性引起国外学者的重视,因为o-HA具有一定的生物学活性,如参与免疫调节、刺激新生血管形成等.本研究建立一种经济、简便的ANTS(8-氨基奈-1,3,6-三磺酸)荧光标记电泳对透明质酸寡糖片段大小鉴定的新实验方法.实验原理为,ANTS能与糖分子发生还原反应,在反应时提供3个电子和1个荧光基团,通过高浓度PAGE分离,在特定波长下呈现颜色反应.采用酶消化法得到不同分子量大小的o-HA片段,测得不同片段大小的o-HA聚合度,分别与高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)和静电喷雾电离质谱(electrospray ionization mass spectrometry,ESI-MS)进行比较,结果吻合.研究提示,用荧光标记电泳法分析寡糖分子量,操作简单、设备低廉、灵敏度较高且检测速度快,是一种检测鉴定寡糖分子的较好方法.

• 单位
  中国科学院上海有机化学研究所; 上海交通大学