SFRP5抑制Wnt/β-catenin通路减轻肾小管上皮细胞上皮—间质转化

作者：邓岱; 吴逸如; 白雨; 刁宗礼; 黄红东; 刘文虎^*

来源：中国临床研究, 2023, 36(07): 1022-1026.

DOI：10.13429/j.cnki.cjcr.2023.07.012

• 肾间质纤维化
• 上皮—间质转化
• 分泌型卷曲相关蛋白5
• Wnt/β-catenin信号通路

目的 探讨分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)在肾小管上皮细胞上皮—间质转化(EMT)中的作用及机制。方法 体外以转化生长因子(TGF)-β1刺激人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞，给予SFRP5与细胞共孵育，应用Western Blot法及RT-qPCR检测细胞中的EMT指标[E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]的mRNA和蛋白表达水平，Western Blot法检测纤维化指标[Fibronectin(Fn)和Collagen I(Col-I)]的蛋白水平；并检测Wnt/β-catenin信号通路中细胞质中磷酸化β-catenin或细胞核中活化β-catenin蛋白水平，TOP/FOP-Flash荧光素酶试验评估β-catenin激活介导的转录及下游靶基因c-Myc和cyclin D1的mRNA水平。结果 TGF-β1刺激后上皮细胞固有E-cadherin水平下降，而α-SMA、Fn和Col-I表达增多(P<0.05);胞质中磷酸化(p-S37位点)β-catenin减少且核内β-catenin水平增加，TOP/FOP比率上升，靶基因c-Myc和cyclin D1转录增加(P<0.05)。加入SFRP5共培养细胞后，上述EMT及纤维化指标变化被逆转，异常激活的Wnt/β-catenin通路中各标志物被抑制，再加入SFRP5特异性中和抗体后SFRP5的抑制及保护作用被取消(P<0.05)。结论 本研究首次发现SFRP5可以减轻TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞EMT和纤维化，其机制与抑制异常激活的Wnt/β-catenin信号通路相关，这可能成为临床诊治及延缓慢性肾脏病进展的新靶点。

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院