酵母双杂交系统筛选番茄SlMPK1互作蛋白

作者：武媛; 何洁; 臧栋楠; 张吉; 杨帆; 朱晓红; 丁海东^*

来源：扬州大学学报（农业与生命科学版）, 2019, 40(06): 24-29.

DOI：10.16872/j.cnki.1671-4652.2019.06.004

• 番茄
• MAPK蛋白激酶
• 酵母双杂交
• 互作蛋白
• SlMPK1

促分裂源活化蛋白激酶(MAPK)在植物生长发育及响应环境胁迫过程中发挥着重要作用。采用酵母双杂交技术,用番茄SlMPK1作为诱饵,从番茄cDNA文库中筛选能与SlMPK1相互作用的蛋白。结果表明:SlMPK1全长序列成功构建至pGBKT7载体,获得诱饵质粒pGBKT7-K1,其对酵母细胞无毒性,且20 mmol·L-1 3-AT能有效抑制其自激活活性。将pGBKT7-K1与含pGADT7-cDNA文库的质粒共转入Y2H Gold酵母中,对阳性克隆进行鉴定,共筛选到155种候选蛋白可能与SlMPK1相互作用,其中SlSPRH1和SlMKK4是已知能与SlMPK1相互作用的蛋白。分析显示,这些蛋白主要参与蛋白折叠、胁迫响应等生物学过程。

• 单位
  扬州大学